芒果MiRab11基因及突变体的原核表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘召亮

作者： 罗聪;董龙;何新华;艮文全;李丽淑;韦鹏霄

作者机构：

关键词： 芒果;MiRab11;突变体蛋白;原核表达;纯化;鉴定

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2014 年 35 卷 09 期

页码： 71-76

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究芒果MiRab11蛋白的互作及其它生物学功能,本文在MiRab11基因序列基础上,采用重叠PCR定点突变技术,获得了2个结构域突变体Mi-Rab11CA和Mi-Rab11DN,将其构建原核表达载体,并成功转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE结果显示,在28℃条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导4 h,可获得大量可溶性蛋白的表达。将可溶性蛋白经Ni-NTA argrose层析柱纯化并western blot鉴定,该重组蛋白均可与抗His单克隆抗体发生特异性免疫反应。本研究为深入研究芒果pET-Rab11蛋白生理活性、特异性结合位点及功能调控打下良好基础。

分类号： S667.7

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