文献类型： 中文期刊
第一作者： 彭珊
作者： 彭珊;闫丽萍;李国新;李雪松;滕巧泱;肖亚莉;何文兴;李泽君
作者机构：
关键词： 鸭坦布苏病毒;荧光定量PCR;TaqMan荧光探针
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2013 年 04 期
页码： 294-298
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为提高鸭坦布苏病毒(DTMUV)TaqMan荧光定量PCR方法的敏感性和简化反应条件,本研究在前期建立的TaqMan荧光定量PCR方法的基础上,设计一条特异性的反转录引物,优化反应体系,建立了简便、快速、敏感的TaqMan荧光定量PCR方法。该荧光定量PCR方法最低检测限为10拷贝,敏感性是未优化的荧光定量PCR方法的5倍、是普通PCR方法的100倍,并且该方法对DTMUV的最低检测限是0.01半数鸡胚致死量(ELD50)。通过批内和批间实验的变异系数表明优化的荧光定量PCR方法的重复性比未优化的荧光定量PCR方法好。通过该优化的荧光定量PCR方法检测其它常见的鸭病病毒的DNAs或RNAs,证明了该方法特异性好。对现地60份疑似DTMUV的样品进行检测,用该方法检出57份样品为阳性,明显高于普通PCR,并且在区分35Ct值左右样品试验中敏感性优于未优化的荧光定量PCR方法。该优化的DTMUV TaqMan荧光定量PCR方法更适用于DTMUV的快速定量流行病学诊断。
分类号： S858.32
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