非洲猪瘟病毒B602L蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及多抗制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨扬

作者： 杨扬;张妍;张俊杰;管志欣;李昱昊;孙卿;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;马志永;魏建超

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;pB602L蛋白;杆状病毒表达系统;免疫原性

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2022 年 54 卷 009 期

页码： 66-70

收录情况： 北大核心

摘要： pB602L蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的非结构蛋白之一.本研究利用杆状病毒表达系统表达了 ASFV pB602L蛋白并制备了该蛋白的鼠源多克隆抗体.将B602L基因克隆入杆状病毒载体pFastbac dual中构建pFast dual-B602L重组质粒,将重组质粒pFast dual-B602L转化至DH10Bac感受态中,经过3次蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-B602L.将重组质粒转染草地贪夜蛾卵巢细胞系(sf9)细胞,获得重组杆状病毒rBac-B602L,细胞出现病变后,在sf9中传3代.通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验鉴定pB602L蛋白的表达及其反应原性.然后使用纯化的pB602L蛋白作为免疫原制备鼠源抗pB602L蛋白多克隆抗体,经过4次免疫后,采取血清以获得抗pB602L蛋白的多克隆抗体,为后续应用ASFVB602L蛋白检测做准备.结果:在重组杆状病毒表达系统中成功表达pB602L蛋白,可被His抗体检测,并可被ASFV阳性血清特异性识别,制备的多克隆抗体具有较高的特异性.本研究表明杆状病毒系统表达的pB602L蛋白具有良好的抗原性,为后续开展非洲猪瘟亚单位疫苗研究和检测奠定基础.

分类号： S852.65

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