麒麟鸡miRNA-1623与靶基因Wnt4的靶标验证分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李珊珊
作者: 李珊珊;孙红梅;张伟;董振;李春义
作者机构:
关键词: 麒麟鸡;卷羽;miRNA-1623;Wnt4;双荧光素酶
期刊名称: 基因组学与应用生物学
ISSN: 1674-568X
年卷期: 2017 年 03 期
页码: 847-853
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 麒麟鸡(frizzle chicken)是我国亚热带地区特有的一种具有卷羽特性的优质肉鸡品种。本课题组前期研究发现在麒麟鸡皮肤中高度表达miRNA-1623(miR-1623),因此推测其参与麒麟鸡毛囊发育及卷羽的形成过程。为研究其独特的毛囊发育及卷羽散热机制,本研究利用生物信息学手段根据其靶标结合位点寻找到其潜在靶标Wnt4基因,并利用qRT-PCR对卷羽麒麟鸡和片羽怀乡鸡中的miR-1623与Wnt4的表达水平进行了检测。进一步通过构建双荧光素酶报告基因pmirGlo载体在细胞水平对miR-1623与Wnt4的靶标关系进行了验证。结果表明:Wnt4 mRNA的3'UTR存在miR-1623靶标结合位点(TGCCTG);相对于怀乡鸡,麒麟鸡皮肤中miR-1623表达水平显著升高(p<0.01),Wnt4 mRNA表达水平显著降低(p<0.01);双荧光素酶检测分析发现miR-1623靶向负调控Wnt4-3'UTR。本实验可为进一步揭示miRNA-1623在禽类毛囊生长发育过程中的作用提供参考。
分类号: S831
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