非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 周改静

作者: 周改静;罗俊聪;石正旺;万颖;杨波;曹丽艳;宋锐;田宏;郑海学

作者机构:

关键词: 非洲猪瘟病毒;p30蛋白;单克隆抗体;阻断ELISA

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2022 年 012 期

页码: 4337-4345

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的p30单克隆抗体作为检测抗体,经条件优化,建立了一种检测ASFV抗体的阻断ELISA方法。ROC曲线分析显示,该方法最佳阻断率临界值为16.63%。该方法与CSFV、FMDV-O/A、PRRSV、PEDV、SVA的阳性血清均无交叉反应;最低能检出1∶128稀释的阳性血清;批内和批间变异系数(CV)均<10%。用本方法与商品化试剂盒平行检测208份血清样品,Kappa值为0.96,表明具有高度一致性。上述结果表明,本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的特异性和敏感性,可用于血清ASFV抗体的检测,为ASFV流行病学调查及猪群疫情监控提供技术支持。

分类号: S852.651

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