猪带绦虫HSP70-4的真核表达及其抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 殷静

作者： 殷静;王帅;刘光学;何伟;才学鹏

作者机构：

关键词： 猪带绦虫;猪囊尾蚴病;HSP70-4;真核表达;抗血清

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 05 期

页码： 544-549

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究猪带绦虫(Taenia solium)热休克蛋白70-4(TsHSP70-4)基因序列的特征及其真核表达蛋白的抗原性,参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,设计特异性引物,RT-PCR扩增TsHSP70-4 ORF序列。根据毕赤酵母密码子偏好性,对TsHSP70-4基因密码子进行优化,连接载体pPIC9K,在毕赤酵母中进行诱导表达,通过Western-blot及质谱测序进行蛋白鉴定。将纯化后的TsHSP70-4表达蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果显示,成功克隆出大小为1 953 bp的TsHSP70-4 ORF序列。在毕赤酵母中进行了高效表达,获得大小约为95ku的重组蛋白。Western-blot检测和质谱鉴定表明,获得的重组蛋白即为TsHSP70-4。免疫新西兰大白兔,制备出效价高达1∶409 600的抗血清。该研究为猪囊尾蚴病新疫苗的研制提供了依据。

分类号： S858.28

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