日本血吸虫重组抗原SjPGAM-SjEnol的保护性免疫效果评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭凡吉

作者： 郭凡吉;王艳;李晔;彭金彪;洪炀;邱春辉;陈实;傅志强;石耀军;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;磷酸甘油酸变位酶;烯醇酶;多表位疫苗;免疫保护

期刊名称： 中国寄生虫学与寄生虫病杂志

ISSN： 1000-7423

年卷期： 2010 年 28 卷 04 期

页码： 246-251

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的构建日本血吸虫重组表达质粒pET32a-SjPGAM-SjEnol并在大肠埃希菌(E.coli BL21)中表达,观察重组抗原在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法利用生物信息学技术筛选SjPGAM和SjEnol富含人源(HLA)Ⅱ类、鼠源(H2-d)Ⅱ细胞结合表位且与宿主同源性较小的肽段,将对应编码的核苷酸序列进行拼接,构建重组质粒pET32a(+)-SjPGAM-SjEnol,并在E.coli BL21中表达。用蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组抗原的抗原性。用小鼠实验评估重组抗原的免疫保护效果,即将55只雄性BALB/c小鼠均分成5组,其中3个试验组分别用重组抗原pET32a-SjPGAM-SjEnol(A组)、pET28a-SjPGAM(B组)、pET28a-SjEnol(C组)(各27μg)与206佐剂混合后免疫小鼠,每次间隔2周,共免疫3次。同时设佐剂对照组(D组)和空白对照组(E组)。末次免疫后2周,每鼠经腹部皮肤分别感染日本血吸虫尾蚴40±2条,感染后6周,经肝门静脉灌注法收集成虫和检测每克肝虫卵数(EPG),计算减虫率和肝脏减卵率。各组小鼠分别于免疫前、各次免疫后1周尾部取血和剖杀时收集血清,应用ELISA检测血清特异性IgG抗体水平。结果确定SjPGAM的96~147、SjEnol的233~312肽段为重组片段。PCR扩增出一条含编码这两个肽段的核苷酸序列的重组DNA序列,大小447bp。获得的重组蛋白pET32a-SjPGAM-SjEnol相对分子质量(Mr)为33000。Westernblotting结果显示,该重组蛋白可被日本血吸虫成虫抗原免疫兔血清识别,具有良好的抗原性。小鼠免疫实验结果显示,与空白组相比,A组获得39.7%的减虫率和64.9%的肝减卵率,其减虫率与B组(18.5%)、C组(14.7%)比较,差异有统计学意义(均P<0.05);肝减卵率与B组(47.5%)、C组(30.5%)比较,差异也有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。ELISA结果显示,第3次免疫后A组的特异性IgG抗体达到较高水平(2.372±0.268),与D组(0.490±0.138)、E组(0.220±0.088)间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了重组表达质粒pET32a-SjPGAM-SjEnol,多表位重组蛋白pET32a-SjPGAM-SjEnol在小鼠抗血吸虫感染中比单一重组抗原pET28a-SjPGAM和pET28a-SjEnol诱导了更高的免疫保护作用。

分类号： R392

  • 相关文献

[1]日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析. 周岩,林矫矫,姚利晓,王欣之,石耀军,陆珂,刘金明,傅志强,陶丽红. 2008

[2]日本血吸虫还原性辅酶I(SjNADH)基因的克隆表达及其免疫保护效果分析. 赵彬,洪炀,曹燕,韩艳辉,吴秀娟,石耀军,林矫矫,陈铁桥,傅志强. 2012

[3]日本血吸虫肌钙蛋白T(SjTnT)基因克隆表达及免疫保护效果评估. 王馨茁,洪炀,韩宏晓,李长健,曹晓丹,陆珂,李浩,朱传刚,傅志强,林矫矫. 2014

[4]日本血吸虫钙调神经磷酸酶B基因的克隆表达及表达产物的免疫保护效果的评估. 伍妙梨,韩艳辉,曹晓丹,张旻,马帅,郭小勇,李长健,王馨茁,洪炀,陆珂,林矫矫,傅志强. 2014

[5]日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究. 张旻,傅志强,林矫矫,洪炀. 2022

[6]日本血吸虫SjIrV1的基因特性及免疫保护效果. 魏梅梅,熊雅念,洪炀,黄莉妮,孟培培,艾德宙,张旻,傅志强,刘升发. 2013

[7]日本血吸虫p53融合蛋白的表达及免疫保护效果评价. 张倩,杨珊珊,何静,黄明月,柴淑梅,洪炀,林矫矫,傅志强. 2023

[8]日本血吸虫Sjzfp1基因的克隆表达及其表达产物的免疫效果. 邢荣鹤,宋震宇,刘金明,王素娟,石耀军,李浩,林矫矫,岳城. 2010

[9]日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估. 胡超,罗荣,刀金威,王宇清,赵江平,陆珂,李浩,刘金明,程国锋. 2014

[10]日本血吸虫SjIM基因克隆表达及动物免疫保护评估. 吕立婷,洪炀,彭金彪,张娟,付志强,林矫矫. 2012

[11]日本血吸虫SjPRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析. 韩宏晓,彭金彪,洪炀,王欣之,石耀军,傅志强,刘金明,程国锋,李祥瑞,林矫矫. 2010

[12]日本血吸虫SjRAD23基因的克隆表达及基因重组抗原的免疫保护效果. 李长健,张旻,洪炀,韩艳辉,曹晓丹,韩宏晓,傅志强,朱传刚,陆珂,李浩,林矫矫. 2014

[13]日本血吸虫基因重组抗原rSj06868对小鼠的免疫保护效果. 王素娟,刘金明,邢荣鹤,石耀军,金亚美,李浩,林矫矫. 2011

[14]日本血吸虫新基因SjPP的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果. 姚利晓,林矫矫,傅志强,朱传刚,李浩,陆珂,刘金明,石耀军,沈阳,蔡幼民. 2006

[15]日本血吸虫重组抗原rSjGALE对小鼠的免疫保护效果分析. 曹宇凡,乔洪宾,刘萍萍,杨云霞,石耀军,李浩,刘金明,林矫矫,金亚美. 2013

[16]日本血吸虫GSK3蛋白编码cDNA的克隆、表达及其重组蛋白的免疫保护研究. 周春景,罗荣,石耀军,赵江平,程国锋. 2012

[17]日本血吸虫新基因Sjnanos的克隆、表达及免疫保护效果评估. 王艳,郭凡吉,彭金彪,李晔,洪炀,陈实,傅志强,石耀军,林矫矫. 2010

[18]日本血吸虫融合表达抗原rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2的免疫保护研究. 秦芳林,李肖纯,程贵凤,吴洛滨,任雨琪,金亚美. 2020

[19]日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析. 洪炀,韩宏晓,彭金彪,李晔,石耀军,傅志强,刘金明,李祥瑞,林矫矫. 2010

[20]日本血吸虫多价核酸疫苗的构建及免疫保护实验. 翟羽佳,刘全,高胜岩,姜丽,门静涛,商立民,魏峰,林矫矫,傅志强,朱兴全. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序