利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎

文献类型： 中文期刊

第一作者： 尉翔栋

作者： 尉翔栋;吕晨晨;朱肖亭;冯亚杰;辛晓玲;施巧婷;梁瑞清;徐照学;王二耀;滑留帅

作者机构：

关键词： 牛;MSTN基因;基因编辑;CRISPR-Cas9;胚胎

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 131-136

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了给双肌肉牛品种的培育提供新的遗传素材,拟利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎。从采集到的86对牛卵巢中收集卵母细胞进行成熟培养以及体外受精,并使用在线软件设计能够在体外高效编辑牛MSTN基因的gRNA序列,将验证后所得的体外切割活性最高的gRNA与Cas9 mRNA的混合物显微注射牛的受精卵,培养至囊胚后,利用T7EI核酸内切酶法检测囊胚中MSTN基因的编辑情况,然后将基因编辑阳性的囊胚样品进行测序验证。结果表明,牛胚胎体外培养平均囊胚率为21.28%;在设计的多条gRNA序列中,gRNA5的体外切割活性最高,为96.00%;将Cas9 mRNA和gRNA5的混合物显微注射受精卵并培养至囊胚后,T7EI核酸内切酶检测表明囊胚MSTN基因切割阳性率为15.40%;对MSTN基因编辑囊胚阳性样品测序表明,在gRNA5靶位点存在部分片段缺失。综上,说明利用CRISPR-Cas9基因编辑技术成功获得了牛MSTN基因编辑胚胎。

分类号： S823`Q78

  • 相关文献

[1]CRISPR-Cas9技术在作物中研究进展. 薛永国,刘鑫磊,唐晓飞,曹旦,栾晓燕. 2020

[2]CRISPR-Cas9基因编辑的历史. 姜奇彦,胡正,孙现军,张辉. 2020

[3]伪狂犬病病毒变异株EP0基因缺失株的构建及其致病力评价. 刘继婷,汤艳东,王同云,蔡雪辉. 2018

[4]CRISPR/Cas9植物基因编辑系统敲除棉花GhSBP基因表达载体的构建. 刘迪,刘琳琳,杜海英,甄军波,蔡肖,张香云,迟吉娜. 2018

[5]CRISPR-Cas9基因编辑技术在牛、羊生产中的应用研究进展. 潘东霞,王辉,熊本海,唐湘方. 2024

[6]应用牙釉蛋白(AML)基因鉴别牛早期胚胎性别. 幸宇云,陈从英,黄路生,任军,陈静波. 2005

[7]卵泡抑素对牛胚胎早期发育的影响. 郭镇华,刘娣,马红,李忠秋,付博,张东杰,汪亮,冯艳忠,唐晓东,张淼,王欣,张海波. 2012

[8]应用PCR法和LAMP法鉴定牛早期胚胎性别的研究. 肖海霞,陈静波,海丽且木,祁志平. 2006

[9]提高牛、羊胚胎冷冻保存效果的措施. 佟桂芝,宋斌,董正德,李信涛,王伟霞,李乃顺. 2018

[10]鉴别牛早期胚胎性别的多重PCR技术研究. 王学清,裴翠娟,李魁英,王银钱,王昆,张峰,吴占军. 2011

[11]牛胚胎生产的全程质量控制. 徐照学,魏成斌,辛晓玲,贺文杰. 2004

[12]利用TSPY基因鉴定奶牛早期胚胎性别的研究. 黄金明,张俊功,游伟,朱荣生,崔绪奎. 2006

[13]牛体外受精的精子获能方法对受精率和胚胎发育的影响. 张明新,及川俊德,沼边孝. 1999

[14]PCR法鉴别牛胚胎性别技术研究. 任克良,梁全忠,毛杨毅. 2000

[15]牛胚胎体外生产与早期胚胎发育的探讨. 张璓,李裕强,李煜,张涌. 2006

[16]切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究. 程金华,朱化彬,王栋,郝海生. 2006

[17]不同培养系统对牛体外胚胎发育的影响. 汪立芹,陈童,杨梅,彭夏雨,林嘉鹏,郭志勤. 2010

[18]体外培养体系对牛体外受精胚胎性比的影响. 辛晓玲,徐照学,贺文杰,施巧婷,魏成斌,楚秋霞. 2006

[19]牛体外受精胚胎冷冻与解冻孵化试验报告. 张明新. 2000

[20]牛早期胚胎性别鉴定体系的建立和优化. 陈从英,黄路生,陈静波,丁能水,周利华,肖海霞. 2003

作者其他论文 更多>>

微信小程序