异种肝移植手术前后移植肝差异表达基因的筛选及验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李霄

作者： 李霄;纪洪辰;潘登科;周亮;窦科峰;陶开山

作者机构：

关键词： 异种移植;肝脏移植;小型猪;藏酋猴;微小核糖核酸;信使RNA

期刊名称： 实用器官移植电子杂志

ISSN： 2095-5332

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 349-354

摘要： 目的探讨异种移植手术前后移植肝内差异表达基因的变化,并且进行筛选及验证。方法以α-1, 3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、藏酋猴为受体,完成4例异种脾窝辅助性肝移植手术。于供肝修整时切取适量术前标本,于移植肝开放血流后48小时以肝穿刺活检获得术后标本。对手术前后的移植肝标本进行miRNAs和mRNAs的高通量芯片分析,筛选出关键的差异表达miRNAs和m RNAs,并进行实时定量PCR及Western Blot实验验证。结果与术前相比,有165个miRNAs在术后出现差异表达,其中上调分子112个,下调分子53个。筛选并验证mi-23b等12个出现显著差异表达的miRNAs,除miR-150和miR-126-3p外,其他miRNAs的表达变化情况与miRNAs芯片结果基本相符。与术前相比,有2 035个mRNAs在术后出现显著差异表达,其中922个表达上调、1 113个表达下调,筛选IGFBP6、CDK2AP1、TNFAIP6、FⅦ、NKG2D等5个生物学功能与肝脏移植密切相关的差异表达基因进行m RNA和蛋白水平验证。除NKG2D外,其他4个基因的蛋白水平表达变化与mRNA水平变化基本一致(均P <0.05),但CDK2AP1的蛋白变化幅度较小,差异无统计学差异(P=0.073)。结论异种肝移植术后移植肝的miRNAs和mRNAs表达出现较大变化,这些差异表达基因可能与免疫损伤及凝血功能障碍有关。

分类号： R657.3

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