Ⅱ型登革病毒铁蛋白纳米颗粒蛋白的真核表达、纯化及免疫效果评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 鲍君铎

作者： 鲍君铎;仇相书;高岩;张佳奇;李霄;金鑫;鲁会军;金宁一

作者机构：

关键词： 登革病毒;铁蛋白;真核表达;纳米颗粒;免疫原性

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2024 年 44 卷 06 期

页码： 1120-1126

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将Ⅱ型登革病毒E蛋白呈递在幽门螺旋杆菌铁蛋白上，构建一种新型登革纳米颗粒候选疫苗，评价疫苗的免疫学指标，旨在为登革疫苗研发提供新思路。经优化合成E-Ferritin-pcDNA3.1重组质粒后转染HEK-293F细胞，对重组蛋白进行表达、鉴定、纯化和构型分析后使用E-Ferritin纳米颗粒疫苗于0、14、28 d后肢肌肉注射免疫小鼠。使用ELISA、中和试验、流式细胞术和淋巴细胞增殖试验检测免疫小鼠的特异性抗体水平、中和抗体水平、脾细胞中CD3~+、CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞含量和特异性刺激后脾淋巴细胞的增殖情况。结果显示，胞内表达出大小约69 kDa的目的蛋白，条带单一，纯化质量浓度0.407 g/L,纯度达到82.32%。透射电镜观察到E-Ferritin蛋白可重组成粒径约50 nm的颗粒结构。小鼠免疫试验结果表明，E-Ferritin蛋白具有良好的免疫原性，一免后42 d血清中特异性抗体效价平均值为1∶92 160,主要表达的抗体亚类为IgG1,倾向于Th2型免疫应答，中和抗体效价达到1∶130。流式细胞术结果表明，重组蛋白E-Ferritin作为免疫原可以诱导机体产生更高水平的CD4~+、CD8~+T淋巴细胞免疫应答。淋巴细胞增殖试验中疫苗组特异性刺激水平显著高于非特异性刺激组。综上得出结论，本研究构建的登革病毒包膜蛋白铁蛋白纳米颗粒疫苗具有良好的免疫原性，可为新型登革候选疫苗研究提供参考。

分类号： S859.797

  • 相关文献

[1]登革病毒铁蛋白纳米颗粒抗原的表达与纯化. 鲍君铎,冯生,高岩,张佳奇,汪伟,李霄,李楠,金鑫,金宁一,鲁会军. 2023

[2]功能化铁蛋白纳米颗粒疫苗的研究进展. 张荣,魏彦明,茹毅. 2024

[3]铁蛋白与口蹄疫病毒VP1在大肠杆菌中融合表达及纳米颗粒自组装. 张伟业,宋浩志,刘兴健,李轶女,张志芳. 2021

[4]Ⅱ型登革病毒重组亚单位候选疫苗构建及免疫原性分析. 王龙龙,于宁,李霄,张赫,鲁会军. 2024

[5]猪德尔塔冠状病毒S蛋白纳米颗粒的构建及免疫原性评价. 张晓蓉,吴建晓,高銘泽,高娜,陈建飞,冯力. 2024

[6]牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析. 李亚军,茹毅,郝荣增,秦晓东,卢炳州,杨洋,刘华南,张越,龚真莉,刘艳红,余四九,郑海学. 2023

[7]CHO细胞表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白及免疫原性分析. 李亚军,茹毅,郝荣增,蒋成辉,王伟,张越,张贵才,刘华南,卢炳州,杨洋,陶世宇,杨锐,宋向东,陈娇,余四九,郑海学. 2022

[8]CHO细胞表达牛病毒性腹泻病毒E2-Erns融合蛋白及免疫原性分析. 李亚军,郝荣增,茹毅,龚真莉,刘艳红,郑海学. 2023

[9]转小麦铁蛋白基因酵母的抗氧化活性. 赵永亮,陈静,王丹,王卫国,李云辉. 2010

[10]转铁蛋白基因增强水稻对氧化胁迫与稻瘟病菌的抗性. 程志强,郭泽建,徐晓晖,柴荣耀,李德葆. 2003

[11]黄花苜蓿铁蛋白cDNA的克隆与序列分析. 郭长虹,王永斌,李丽娅,沙永群. 2009

[12]重组H5N1亚型流感病毒铁蛋白纳米粒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定. 陈璐儿,庄忻雨,张桐,孙世宇,汪伟,曾博宇,于潼,鲁会军,田明尧,金宁一. 2021

[13]低温驯化过程中油菜叶片钙、镁、铁的亚细胞分布特征(英文). 张树杰,张春雷. 2012

[14]转人乳铁蛋白羊奶生物安全试验. 武建明,庾庆华,刘思国,杨倩,王峰,何洪彬. 2013

[15]铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测. 宋若楠,刘春草,李航,王真真,贾楠楠,朱杰,李传峰,程松,梁留存,刘光清,王金泉,孟春春. 2024

[16]团头鲂铁蛋白基因的克隆及其在嗜水气单胞菌感染下的表达. 孙盛明,戈贤平,朱健,张成锋,缪凌鸿. 2015

[17]黄素氧还蛋白参与的固氮链电子传递. 尤崇杓,高盟生. 1987

[18]棕色固氮菌固氮链中的能量转化. 高盟生,尤崇杓. 1987

[19]微小牛蜱铁蛋白编码基因的克隆和分析. 白霞,周金林,程天印,周勇志,刘毅. 2005

[20]N↓2和NH↑＋↓4培养下粪产碱菌固氮酶铁蛋白圆二色谱及热力学特性比较. 海伟力,宋未,尤崇杓,李忠,王文清. 1994

作者其他论文 更多>>

微信小程序