禽流感病毒神经氨酸酶基因在重组杆状病毒中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙晓东

作者： 孙晓东;包红梅;赵玉辉;路冰;孙佳善;文雪霞;熊永忠;陈化兰;王秀荣

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;神经氨酸酶;重组杆状病毒

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2012 年 44 卷 05 期

页码： 16-20

收录情况： 北大核心

摘要： 根据已知H5N1亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计并合成引物。从H5N1亚型病毒感染的鸡胚尿囊液中提取总RNA,反转录后采用高保真DNA聚合酶扩增NA基因,构建转移载体pFastBacHTA-NA,并与大肠杆菌DH10Bac的Bacmid质粒重组,构建重组转座质粒rBacmid-NA。在脂质体介导下将rBacmid-NA转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。在sf9昆虫细胞中表达NA蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot和激光共聚焦检测蛋白。结果表明:表达的NA蛋白分子量约为53 ku,该蛋白能与H5N1亚型AIV血清发生特异性反应,证明NA蛋白表达正确,具有良好的免疫反应性。

分类号： S852.652

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