鲨鱼弧菌LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘金叶

作者： 刘金叶;冯娟;刘广峰;苏友禄;徐力文;郭志勋;王云新

作者机构：

关键词： 鲨鱼弧菌;环介导等温扩增技术;rpoA基因

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2012 年 39 卷 03 期

页码： 146-149+233

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用环介导等温扩增技术(LAMP)成功构建了一种鲨鱼弧菌的检测方法。根据鲨鱼弧菌的rpoA基因序列设计4条引物(内引物F3和B3,外引物FIP和BIP),并对LAMP扩增反应的各物质浓度和反应条件进行优化,确定最佳反应温度为65°C,最佳反应时间为55 min。该法对鲨鱼弧菌纯菌培养物的检测浓度约为2.4×102CFU/mL,结果比PCR法具有相似或更高的灵敏度,而且操作简单,反应后体系变浑浊,肉眼可辨;加入SRYB Gold荧光染料,阳性反应为绿色,阴性对照为浅橘色,更便于观察,有望发展成为快速检测鲨鱼弧菌的一种有效方法。

分类号： S941

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