鸭抗原相关转运体TAP1和TAP2原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张晓娜

作者： 张晓娜;吴少莲;文辉强;廉传江;陈洪岩;韩凌霞

作者机构：

关键词： 鸭;抗原相关转运体;肽结合区;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2015 年 11 期

页码： 40-43

收录情况： 北大核心

摘要： HBK鸭是国家禽类实验动物种子中心培育的我国首个无特定病原体(SPF)鸭,已封闭饲养9个世代。鸭抗原处理相关转运体(TAP)基因位于主要组织相容性复合体区域,TAP1和TAP2组成的二聚体具有将抗原肽从细胞质转运入内质网腔的重要作用。为了表达鸭抗原相关转运体蛋白,并制备特异性多克隆抗体,试验采用PCR方法扩增HBKB系鸭的TAP1完整基因和TAP2基因的预测肽结合区(PBD),分别命名为TAP1和TAP2PBD,克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒p ET-TAP1和p ET-TAP2PBD,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达后进行SDSPAGE及Western-blot鉴定,表达产物经SDS-PAGE后分别切胶免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体。结果表明:两种目的蛋白均获得了正确表达。说明试验制备了高特异性鸭TAP1和TAP2多克隆抗体,可用于水禽TAP的结构和功能研究。

分类号： S852.4

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