工程菌表达融合型酯酶B1发酵条件的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张丽青

作者： 张丽青;姜红霞;闫艳春

作者机构：

关键词： 环境微生物学;酯酶B1;融合蛋白;工程菌

期刊名称： 环境与健康杂志

ISSN： 1001-5914

年卷期： 2009 年 26 卷 06 期

页码： 490-493

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的提高酯酶B1融合蛋白的表达量,研究pThioHisA-B1/DH5α工程菌株的最优发酵条件。方法依次在不同的培养基(LB,SOB,YT,TB)、诱导时间(1～8h)、诱导剂浓度(0.3～1mmol/L)、诱导温度(25～37℃)等因素变化下,研究融合蛋白的表达量;目的产物经SDS-PAGE电泳和薄层凝胶扫描,以获得最佳表达条件。结果工程菌优化的发酵条件为,最适宜的培养基为TB,诱导剂IPTG的最佳浓度为0.4mmol/L,最佳诱导时间为6h,最佳诱导温度为28℃。工程菌在最佳条件下表达时,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40.3%,其中66.2%为可溶性蛋白。结论本实验筛选出了工程菌的最优化发酵条件,利用本实验的优化条件可获得高产量、可溶性的酯酶B1融合蛋白,为酯酶B1的进一步放大生产和实际应用奠定了基础。

分类号： Q78

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