2,4-D人工抗原合成及2,4-D类农药特异性多克隆抗体的研制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王升吉

作者： 王升吉;尚佑芬;赵玖华;杨崇良;路兴波;孙红炜

作者机构：

关键词： 2,4-D;半抗原;免疫抗原;酶联免疫吸附测定(ELISA);抗体

期刊名称： 农业环境科学学报

ISSN： 1672-2043

年卷期： 2008 年 27 卷 05 期

页码： 2052-2057

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过改良EDC法,将2,4-DB、2,4-D分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联合成了2,4-D的免疫原2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA和包被原2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA。免疫抗原测定结果表明,所得紫外吸收光谱,具有载体蛋白BSA和半抗原2,4-DB或2,4-D的特性,最大吸收峰为282nm。合成2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA免疫抗原的结合比分别为1∶24、1∶20,合成的2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA包被原的结合比分别为1∶10、1∶8。上述两种免疫原分别免疫新西兰白雄兔,获得2,4-D类农药多克隆抗体。其中免疫2,4-DB-BSA的两只兔PBD1和PBD2的效价较高,分别是1∶102400和1∶51200。选择效价较高的PBD1多克隆抗体进一步优化筛选出抗原抗体的工作浓度,2,4-D-OVA包被原3μg·mL-1,PBD1多克隆抗体1∶12800。经测定,该多克隆抗体对目标检测物2,4-D、2,4-Dbutylester敏感度较高,抑制中浓度(I50)、检测限(I20)分别为,2,4-D:179.8ng·mL-1,1.09ng·mL-1;2,4-Dbutylester:3010.0ng·mL-1,1.53ng·mL-1。对2,4-D识别的特异性也较强。另外测定了制备2,4-D多克隆抗体对几种2,4-D类似结构化合物交叉特异性反应,2,4-DB最强,2,4-D次之,之后依次为2,4-D丁酯、2,4-D异丙酯,交叉反应性较差的有2甲4氯、2,4,5-涕、2,4-滴丙酸。

分类号： S481.8

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