麻鸭HSP90α基因的原核表达、纯化及磷脂结合活性的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张玉梅

作者： 张玉梅;李鹏鹏;张牧焓;王晶晶;王道营;徐为民

作者机构：

关键词： 麻鸭;HSP90α;原核表达;纯化;磷脂结合

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 99-104

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究麻鸭(Anas platyrhynchas)热休克蛋白HSP90α结合肌内磷脂及抑制磷脂水解的作用机制,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,以麻鸭骨骼肌细胞cDNA为模板扩增HSP90α基因,构建重组表达质粒在大肠杆菌中诱导表达,镍柱亲和层析和凝胶层析纯化可溶性重组蛋白。结果表明,获得的HSP90α开放阅读框全长为2 187 bp,编码728个氨基酸,预测的理论等电点约为5。构建的原核表达载体pCold1-HSP90α在大肠杆菌中成功可溶性表达了麻鸭HSP90α,并获得了高纯度的重组HSP90α蛋白。运用薄层层析证明该重组蛋白具有稳定结合磷脂酰胆碱的活性,并且该蛋白能显著削弱磷脂酶A2对磷脂的水解作用。该研究成功克隆并建立了麻鸭HSP90α基因的原核表达体系,制备了具有磷脂结合活性的重组蛋白,为进一步研究HSP90α与磷脂的相互作用及对肉品加工中磷脂的保护效应提供了理论支持。

分类号： S834.83

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