转导芦苇总DNA耐盐变异水稻SSH文库的构建及部分基因特异表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 肇莹

作者： 肇莹;肖军;杨镇;杨涛

作者机构：

关键词： 水稻;芦苇;抑制消减杂交;cDNA文库;基因表达

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2015 年 43 卷 03 期

页码： 13-16

收录情况： 北大核心

摘要： 通过花粉管通道转导芦苇总DNA到水稻辽星1号中,以获得的2个耐盐变异水稻品系H1、H2为材料,对6张叶的水稻幼苗进行0.3%浓度的Na Cl溶液诱导处理24 h。提取经Na Cl溶液诱导后的叶片mRNA,经反转录成cDNA,经过酶解后加接头和2次杂交,构建差异表达的抑制消减(SSH)cDNA文库。以Na Cl溶液诱导后的耐盐变异水稻H1、H2的cDNA为检测子(tester),以水稻辽星1号cDNA为驱动子(driver)。所构建的文库容量分别达到了240、281个,表明所构建的文库质量良好。对文库中克隆进行测序分析,在NCBI水稻数据库中进行BLAST比对,获得了15个没有同源性的EST序列,其中9个EST序列功能与植物的抗盐性有关,通过RT-PCR技术进一步验证了芦苇总DNA转导到水稻中,使水稻获得了抗盐性。

分类号： S511

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