猪博卡病毒NP1基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李彬

作者： 李彬;毛立;何孔旺;温立斌;茅爱华;张雪寒;倪艳秀;郭容利;马俊杰;周俊明;吕立新;俞正玉

作者机构：

关键词： 猪博卡病毒;NP1基因;克隆;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2011 年 26 卷 03 期

页码： 28-31

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为46 kDa的融合蛋白,蛋白表达量较高,而且蛋白以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western Blot结果显示,表达的NP1蛋白能与His抗体发生特异性的免疫反应,表明原核表达的NP1蛋白具有良好的反应原性。

分类号： S852.65

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