桔青霉木聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达及活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田谷

作者： 田谷;顿宝庆;王智;李维维;许修宏;李桂英

作者机构：

关键词： 桔青霉;木聚糖酶;毕赤酵母;酶学性质;表达

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2012 年 0 卷 06 期

页码： 87-93

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过同源序列PCR克隆的方法,获得桔青霉(Penicillium citrinum)CR-2菌株的木聚糖酶编码基因xyl,该基因全长984 bp,编码327个氨基酸,无内含子序列,具有完整开放阅读框。其编码的氨基酸序列N端具有一段包含19个氨基酸的信号肽序列,并具有糖基水解酶第10家族(GH10)的保守催化域特征,推测该酶属于第10家族成员。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9相连接构建重组载体pPIC9-XYL,电击转化至毕赤酵母GS115菌株中。挑选阳性重组子经测序、酶活性以及SDS电泳分析表明,xyl基因成功在毕赤酵母中分泌表达,重组酶活性可达214.15 IU/mL。该重组酶最适温度与最适pH分别为50℃和4.5,且具有良好的pH和热稳定性。

分类号： Q78

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