乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭亦非

作者： 郭亦非;郑浩;郑旭晨;童武;刘飞;梁超;单同领;于海;童光志

作者机构：

关键词： 乙型脑炎病毒;NS1';突变;毒力

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2014 年 02 期

页码： 27-31

摘要： 通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1'基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段,获得了2株突变全长克隆。经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2。通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变,vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变。将vJET1和vJET2感染Vero细胞后,Western blot检测显示,两株突变病毒表达的NS1'蛋白均出现延长现象。生长曲线显示,与亲本病毒vTHen相比,突变病毒增殖速度均出现下降。动物实验显示,与vTHen相比,vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降。上述结果表明,NS1'编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度,也减弱了病毒对小鼠的毒力。

分类号： S852.65

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