弓形虫ITS-1序列PCR诊断方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邵国青

作者： 邵国青;杨莉莉;王继春;刘茂军;周勇岐;孙佩元;杜改梅;吴叙苏;刘冬霞

作者机构：

关键词： 弓形虫;PCR;ITS-1

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2008 年 24 卷 05 期

页码： 446-450

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的本文旨在为弓形虫感染的临床病例检测建立特异性PCR诊断方法。方法本研究以弓形虫ITS-1序列为种特异性遗传标记,采用有限稀释法稀释速殖子DNA,经PCR扩增,检测该方法的敏感性;用同一引物扩增鸡柔嫩艾美耳球虫原虫和弓形虫,检测PCR方法的特异性。人工感染小鼠和家兔,用组织触片法和PCR方法检测感染动物的组织,并检测10头临床疑似病猪的肺脏、肺门淋巴结、脾脏、肾脏和肝脏等组织,比较两者的敏感性。结果该PCR方法最低可以检测1pg弓形虫速殖子DNA(相当于10个速殖子的DNA);鸡柔嫩艾美耳球虫原虫未扩增出特异条带,仅弓形虫出现特异条带(300bp)。组织触片和PCR方法对人工感染小鼠组织DNA的检出率均为87.5%(7/8),对人工感染家兔的检出率分别为50%(3/6)和66.7%(4/6),对临床疑似弓形虫病猪检测的阳性率均为20%,两种方法的检查结果基本一致。结论本试验结果表明,PCR技术可以作为弓形虫感染动物的诊断与检测方法。

分类号： R450

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