过表达TPL2蛋白PK-15细胞系的建立及其功能验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郝军红

作者： 郝军红;闫鸣昊;张大俊;张学刚;申超超;徐国伟;李国丽;张克山;郑海学;刘湘涛

作者机构：

关键词： TPL2基因;PK-15细胞系;FMDV;SVV;慢病毒表达系统

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2020 年 07 期

页码： 1319-1324

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过基因合成的TPL2(tumor progression locus 2)质粒,获得稳定表达TPL2的PK-15/TPL2细胞系。将慢病毒载体Lv-PCDH和TPL2(Pig)重组慢病毒载体Lv-TPL2(Pig)利用转染试剂将其转染至PK-15细胞。感染48 h后,加入嘌呤霉素进行药物筛选,通过筛选得到的阳性细胞株PK-15/TPL2即为稳定表达TPL2蛋白的PK-15细胞株。通过qRT-PCR法和琼脂糖凝胶电泳、IFA,TCID_(50)技术验证PK-15/TPL2细胞系和对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)和猪塞内加谷病毒(seneca valley virus,SVV)病原复制的影响。结果显示,细胞表达大量的TPL2的基因产物,用FMDV、SVV病毒感染稳定表达TPL2的PK-15细胞株时,明显抑制病毒的复制。结果表明,利用该技术可高效快速地建立了稳定高表达TPL2的PK-15细胞系,该细胞株的建立为病毒的分离及TPL2的生物学活性研究奠定理论基础。

分类号： S852.65

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