高分辨熔解曲线技术结合荧光实时PCR法同时检测鸡肉中4种食源性致病菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张静

作者： 张静;周倩;唐梦君;张小燕;唐修君;陆俊贤;高玉时;顾荣

作者机构：

关键词： 高分辨熔解曲线;食源性致病菌;荧光PCR;鸡肉

期刊名称： 现代食品科技

ISSN：

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 296-303

收录情况： 北大核心

摘要： 建立高分辨熔解曲线技术同时快速检测鸡肉中沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌。本研究分别以上述4种菌的fim Y、hly、nuc和orf C特异性基因为靶基因,建立能同时检测多种食源性致病菌的多重HRM-real time PCR检测体系,并对反应的特异性、灵敏度、重复性以及在人工染菌样品进行了评价。所建立的HRM-real time PCR检测体系对沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌均产生特异性熔解曲线,Tm值分别为82.2℃、78.2℃、75.5℃和73.5℃;多重HRM-real time PCR反应体系检测单一致病菌菌液的灵敏度均为102拷贝数/m L,检测多种致病菌菌液的灵敏度为102拷贝数/m L;该反应体系重复性的试验内CV值在0.03%～0.32%之间,试验间CV值在0.45%～2.12%;人工染菌样本对4种菌的检测限均能达到5 CFU/25 g。结果表明该多重HRM-real time PCR检测体系可对上述4种禽肉中常见致病菌进行有效的检测与区分,特异性强,灵敏度高,反应重复性好,有望在食源性致病菌检测分析中发挥作用。

分类号： TS251.55

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