树状多节孢酸性磷酸酶的分离纯化与性质研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张国庆
作者: 张国庆;王有志;王守现;王贺祥;陈青君
作者机构:
关键词: 树状多节孢;酸性磷酸酶;性质;酶活性
期刊名称: 菌物学报
ISSN: 1672-6472
年卷期: 2011 年 30 卷 05 期
页码: 88-94
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 树状多节孢Nodulisporium sylviforme是从东北红豆杉Taxus cuspidata分离、可产生紫杉醇的内生真菌。研究以树状多节孢为材料,利用液体发酵手段获得菌丝体,通过CM-cellulose阴离子交换柱层析、Q-Sepharose阳离子交换柱层析和FPLC凝胶过滤层析(Superdex 75),获得纯化的树状多节孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。结合FPLC和SDS-PAGE分析,判定该磷酸酶为分子量44kDa单亚基蛋白。酶学性质研究表明,其最适pH值为3.0,最适温度为58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+对酶活有30%-50%的促进作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+对酶活有显著的抑制作用;当Fe2+浓度低于25mmol/L时表现为促进作用,但浓度达到50mmol/L时磷酸酶完全失活。
分类号: Q814.1
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