当归DXR基因保守区克隆和组织特异性表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 雒军

作者： 雒军;王引权;温随超;张金林;夏琦

作者机构：

关键词： 当归;1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶;克隆;肌动蛋白;RT-PCR

期刊名称： 中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2014 年 45 卷 13 期

页码： 1907-1913

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的克隆当归Angelica sinensis 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达。方法根据已克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序。运用RT-qPCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测DXR在当归不同组织中的表达量。结果得到一段564 bp的DXR基因序列,并在GenBank注册(登录号:KJ000259)。序列分析表明,该片段编码187个氨基酸,与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80%以上;DXR在叶中表达量最高,相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍(P<0.01)。结论本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列,并揭示了DXR在不同组织中的差异表达,为有效利用该基因奠定前期工作基础。

分类号： S567.239

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