草鱼生长激素非竞争式酶联免疫吸附测定法的建立及鉴定(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈松林

作者： 陈松林;陈细华;邓文涛;贺路;杨峰

作者机构：

关键词： 草鱼;生活激素;单克隆抗体;非竞争式酶联免疫吸附测定法

期刊名称： 动物学报

ISSN： 0001-7302

年卷期： 1996 年 04 期

页码： 386-393

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）单克隆抗体及多价兔抗血清建立了草鱼ＧＨ非竞争式酶’联免疫吸附测定ＥＬＩＳＡ系统。用正辛酸法对腹水单抗进行了分离纯化，获得了高纯度的单抗制备物。聚丙烯酸胺凝胶电泳表明纯化的单抗由分子量分别为５５ｋＤ和２５ｋＤ的两条蛋白带组成。用纯化单抗铺底，用兔抗血清作后续抗体建立了一种测定草鱼ＧＨ的非竞争式双抗夹心ＥＬＩＳＡ方法。交叉试验表明该测定系统只与草鱼ＧＨ和基因重组鲤生长激素（ｒｃＧＨ）具有剂量依存的结合反应，而与大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）、牛生长激素（ｂＧＨ）、大马哈鱼促性腺激素（ｓＧｔＨ）、及黑鲢促性腺激素（ｂｓｃＧｔＨ）等均无交叉反应。该 ＥＬＩＳＡ方法的灵敏度可达０．８ｎｇ／ｍｌ，组内变异系数为 ５．９ ％，组间变异系数为７．６％，回收率达９０％以上。初步应用表明，鲤和团头鲂垂体抽提液、草鱼血清、鲤血清及鲫血清在该测定系统中有剂量依存的反应曲线，而大口鲶、黄颡鱼、中华鲟及黄鳝鱼垂体抽提液及大口鲶、胡子鲶和罗非鱼血清在该测定系统中没有交叉反应。

分类号： Q57

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