Cullin-2基因敲除A549细胞系构建及其对A型流感病毒复制的影响
文献类型: 中文期刊
第一作者: 史馨瑾
作者: 史馨瑾;王俊;刘英楠;陈鸿军
作者机构:
关键词: A型流感病毒;CRL复合体;Cullin-2;细胞因子
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2022 年 30 卷 005 期
页码: 29-35
摘要: CRL复合体是泛素蛋白酶体降解系统中的核心酶,很多病毒会劫持宿主CRL复合体,激活或干扰其底物的降解,创造有利病毒复制的环境.本研究为了探讨CRL2复合体和流感病毒之间的关系,利用CRISPR/Cas9技术构建CRL2复合体骨架蛋白Cullin-2基因稳定敲除A549细胞系,并验证Cullin-2基因敲除对流感复制的影响.设计两条靶向Cullin-2的sgRNA,构建到敲除载体中,包装成慢病毒感染细胞,经过药物筛选和亚克隆纯化后,利用蛋白免疫印迹法和敲除位点测序鉴定,并比较野生型和Cullin-2敲除细胞中AIV的复制效率.结果显示,Cullin-2敲除对流感病毒滴度和病毒蛋白水平影响不显著,但会导致细胞因子转录水平的上调,为CRL复合体与流感病毒致病性机制关系研究提供新的思路.
分类号: S852.65
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