巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林秀琴

作者： 林秀琴;邓军;袁坤;王真辉;杨礼富

作者机构：

关键词： 巴西橡胶树;蛋白样品;双向凝胶电泳(2-DE);MALDI-TOFMS

期刊名称： 热带农业科学

ISSN： 1009-2196

年卷期： 2009 年 29 卷 04 期

页码： 1-6

摘要： 采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向凝胶电泳(2-DE)的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE(双向电泳)图谱效果更好(7cm,考染)。根据预实验结果,选用17cmIPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOFMS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是:1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基和F11O4.2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。

分类号： S794.1

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