橡胶树酵母双杂交文库构建及HbTRXy2互作蛋白筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴双

作者： 吴双;逯锐琳;何其光;袁坤;胡义钰;王真辉;刘进平;刘辉

作者机构：

关键词： 橡胶树;硫氧还蛋白;酵母双杂交;酵母文库构建;互作蛋白

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2025 年 46 卷 006 期

页码： 1279-1287

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 硫氧还蛋白通过催化硫醇-二硫键交换反应调节靶蛋白的结构和功能，在维持细胞氧化还原稳态中发挥关键作用。前期研究证实橡胶树y型硫氧还蛋白HbTRXy2具有很强的抗氧化功能。为探究HbTRXy2调控抗氧化性的分子机制，本研究构建橡胶树酵母双杂交文库及HbTRXy2诱饵载体pGBKT7-HbTRXy2，并通过酵母双杂交筛选与HbTRXy2互作的蛋白。结果显示：本研究构建的次级文库重组率为100%，插入片段平均长度大于1000bp，库容量为3.80×10～6 CFU/mL；经检测，诱饵载体pGBKT7-HbTRXy2在酵母中无毒性和自激活活性，可用于酵母双杂交筛选；采用共转化法从构建的文库中筛选到与HbTRXy2互作的蛋白24个。生物信息学分析表明，这些候选互作蛋白的功能涉及氧化还原、逆境胁迫响应、ATP结合与代谢、卡尔文循环、单碳代谢、碳固定、蛋氨酸生物合成、脂质A生物合成、金属离子结合或转运、跨膜转运、细胞体积调控、磷酸根离子稳态、蛋白质磷酸化和蛋白质折叠等。本研究结果为深入解析HbTRXy2在橡胶树中的功能及其作用机理奠定基础。

分类号： S794.1

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