文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘本金
作者： 刘本金;郑亚婷;许腾林;姜骞;刘家森;康洪涛;田进;郭东春;曲连东
作者机构：
关键词： 多杀性巴氏杆菌;TaqMan探针;荧光定量PCR
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN：
年卷期： 2021 年 005 期
页码： 501-506
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为建立可以同时检测多杀性巴氏杆菌（Pm）及其荚膜A型的快速敏感检测方法,本研究在建立的Pm kmt1基因的荧光定量PCR基础上,设计了该菌capA基因特异性引物和Taq Man探针,经优化反应条件建立了双重Taq Man荧光定量PCR检测方法。本实验从荚膜A型Pm C48-1菌株中扩增了capA基因,构建了重组质粒pMDcapA;以pMD-capA重组质粒为标准品,建立的标准曲线在9.83×103拷贝/μL～9.83×109拷贝/μL内与Ct值具有良好的线性关系,相关系数（R2）为0.9873,扩增效率（E）为1.032。建立的双重荧光定量PCR方法可以同时检测Pm及其荚膜A型,而对B型、D型Pm、鸭疫里默氏杆菌、支气管败血波氏杆菌等细菌检测结果均为阴性,具有较强的特异性;对重组质粒标准品的检测灵敏度为101拷贝/μL,高于常规PCR检测方法（103拷贝/μL）100倍具有较高的敏感性;组内和组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有较好的重复性。本实验建立的双重荧光定量PCR方法可以同时快速敏感地检测Pm及其荚膜A型,对于其临床和实验室的快速诊断具有重要意义。
分类号： S852.61
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