不对称RT-PCR结合芯片技术鉴别4种禽病的初步研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陶启蒙

作者： 陶启蒙;王秀荣;武嘉男;石霖;李雁冰;包红梅;陈化兰

作者机构：

关键词： 不对称PCR;基因芯片;禽病;禽流感亚型;鉴别

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 12 期

页码： 954-958

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究结合非对称RT-PCR和基因芯片两种技术,构建可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型和N1、N2神经氨酸酶亚型以及鸡传染性支气管炎病、新城疫病、鸡传染性法氏囊病的基因芯片。分别T/A克隆部分禽流感病毒的M基因,H5、H7、H9亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因,鸡传染性支气管炎病毒np基因、新城疫病np基因、鸡传染性法氏囊A基因,并构建重组质粒;以重组质粒为模板,用PCR方法扩增制备探针,纯化后点于氨基修饰的载玻片上,制备基因芯片;常规方法从待检样品中提取RNA,用Cy3标记引物进行RT-PCR,将荧光素引入PCR产物中;并对扩增条件进行优化。研究发现检测探针可特异性的与相应的标记样品进行杂交,呈现较强的杂交信号;该方法可以准确进行4种主要禽病的鉴别诊断和禽流感主要流行亚型鉴定,对感染样品和现地样品检测结果与RT-PCR、鸡胚接种有较高一致性,符合率分别为100%和96%。结果显示该方法可用于同步鉴别禽流感、鸡传染性支气管炎、新城疫、鸡传染性法氏囊病,以及现地主要流行的禽流感亚型,是一种有效的新方法。

分类号： S854.44

  • 相关文献

[1]单链标记与芯片结合鉴别AIV主要亚型的研究. 陶启蒙,王秀荣,武嘉男,石霖,李雁冰,包红梅,陈化兰. 2008

[2]4种禽病毒抗体可视化蛋白芯片的制备及应用. 石霖,王秀荣,杨忠苹,陶启蒙,蔡冬冬,武嘉男,王馥梅,田国彬,陈化兰. 2009

[3]1K梅花鹿基因芯片的应用. 范欢欢,王天骄,张然然,邢秀梅. 2022

[4]不对称PCR的引物浓度优化及在柑橘基因型分析上的应用. 魏召新,朱世平,阳佳位,闫树堂,洪林. 2016

[5]中草药在禽病防治中的推广应用. 潘淑惠,文正常. 2014

[6]禽病远程网络诊断技术云平台的架构与展望. 赵秀美,周生,俞燕,高明燕,姜逸,程旭,李建梅,戴有礼. 2021

[7]家禽疾病远程诊断平台的构建. 赵秀美,章明,周生,俞燕,徐步,范建华,姜逸,戴有理. 2017

[8]我国水禽产业发展现状及制约因素分析. 张玉霞,亓丽红,王友令. 2018

[9]当前禽病流行状况与防治措施. 李新华. 2008

[10]第二部分 过去二十年中十个重要禽病 :二十年禽病防控之总结. 陈连颐. 2005

[11]养鸡技术讲座. 刘文奎. 1997

[12]病毒样颗粒疫苗及其在禽病防控中的应用. 陈秀琴,郑敏,黄梅清,陈少莺. 2018

[13]禽白血病的流行学特点及防制措施. 李新华. 1997

[14]病毒样颗粒疫苗及其在禽病防控中的应用. 陈秀琴,郑敏,黄梅清,陈少莺. 2018

[15]禽病的预防、控制和急救措施. 熊国远. 1999

[16]2023年监测中心第四季度禽病检测动态. 马秀丽,刘丽萍,高月花,于可响,胡峰,黄兵,秦卓明. 2024

[17]禽病的药物防治基本技术. 李立虎. 2009

[18]当前我国鸭病的流行动态与防制对策. 胡青海,刘晓文,苗晋锋,赵东伟,张知良,丁铲. 2001

[19]芸苔链格孢菌与白菜互作基因表达谱芯片分析. 刘影,徐文静,杜茜,杨信东,李启云. 2010

[20]民猪耐寒基因目标风险最小特征搜索. 杨月莹,刘娣. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序