木薯MeCML24与MeSAUR1互作调控MeAGPS1a表达的功能验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑婉茹

作者： 郑婉茹;丁凯旋;陆小花;李琳琳;王超群;陈银华;姚远;陈新;耿梦婷

作者机构：

关键词： 木薯;MeCML24蛋白;MeSAUR1蛋白;互作蛋白;MeAGPS1a启动子;转录调控

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 1-8

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 木薯是华南地区重要的经济作物，其块根富含淀粉。解析木薯块根淀粉合成调控机理将有助于木薯高产、高淀粉分子改良。AGPase由大亚基和小亚基构成，催化1-磷酸葡萄糖和ATP形成腺苷二磷酸葡萄糖和焦磷酸，其中腺苷二磷酸葡萄糖为淀粉生物合成的底物。AGPase酶是植物淀粉合成的限速酶，提高AGPase酶活性，有利于作物淀粉的积累及产量的提高。木薯MeAGPS1a基因编码的小亚基是AGPase的催化中心，前期研究表明生长素响应因子MeSAUR1作为转录因子正调控MeAGPS1a基因表达，酵母双杂交筛选木薯cDNA文库显示钙调素类似蛋白（CaM-like, CML）成员MeCML24为MeSAUR1的候选互作蛋白。为了确定MeCML24和MeSAUR1的互作关系，本研究从‘SC8’木薯品种基因组克隆了MeCML24基因，该基因的CDS区长度为492 bp，编码163个氨基酸。MeCML24蛋白的理化性质及二级结构分析显示，该蛋白理论等电点pI值4.38，属于亲水性蛋白，α-螺旋占52.76%，无规则卷曲占30.06%,β-转角结构占11.04%。构建酵母双杂交载体BD-MeCML24，自激活实验表明MeCML24不具有自激活活性。酵母双杂交点对点实验发现，共转AD-MeSAUR1和BD-MeCML24质粒的酵母菌株在SD/TLHA+x-α-gal培养基上变蓝，表明MeCML24与MeSAUR1存在互作关系。采用双分子荧光互补（BiFC）实验，将融合蛋白MeSAUR1-nEYFP和MeCML24-cEYFP在烟草叶片中共表达，在激光共聚焦显微镜下检测出黄色荧光蛋白EYFP的荧光信号，进一步证明了MeCML24与MeSAUR1互作。最后利用双荧光素酶实验证明MeCML24与MeSAUR1互作负调控MeAGPS1a基因表达。本研究揭示了木薯MeSAUR1与MeCML24协同调控MeAGPS1a基因表达的机制，发现钙调素类似蛋白MeCML24参与调控木薯块根淀粉合成关键基因MeAGPS1a表达，为利用分子生物学技术培育木薯优良品种提供了理论基础。

分类号： S533

  • 相关文献

[1]木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定. 张建禹,王晓彤,耿沙,毋志浩,任思杨,李瑞梅,姚远,郭建春,刘姣,胡新文. 2022

[2]木薯MeSAUR1互作蛋白的筛选及鉴定. 郑婉茹,丁凯旋,陆小花,王睿,陈银华,姚远,陈新,耿梦婷. 2023

[3]木薯MeHsfB3a互作蛋白的筛选和鉴定. 李琳琳,王超群,李春霞,骆凯,王红刚,陈银华,张肖飞,姚远,耿梦婷. 2023

[4]木薯MeUGT85K4基因的克隆和功能分析. 赵平娟,郭鑫,林晨俞,张秀春,王海燕,彭明. 2021

[5]斜纹夜蛾酵母双杂交文库的构建及其在蜕皮激素受体互作蛋白筛选中的应用. 范琳芳,何文婧,苏智仁,朱家明,罗威,张纯,黄立华. 2016

[6]大豆高盐胁迫下根部组织酵母双杂交文库的构建与分析. 何晓兰,许玲,徐照龙,卫陪陪,刘晓庆,黄益洪,张大勇. 2013

[7]小麦DREB转录因子TaAIDFa的互作蛋白筛选. 郑甲成,徐兆师,胡银岗,刘婷,李连城,陈明,马有志. 2010

[8]基于酵母双杂交系统筛选灰飞虱体内与大麦黄条点花叶病毒核衣壳蛋白互作的蛋白质. 刘文文,刘艳,王锡锋. 2019

[9]应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白. 张阳,张玲玲,李若佼,谢欣冉,李仰平,李婉茹,包振民. 2019

[10]稻曲病菌交配型基因MAT1-2-1和MAT1-2-8的特性分析. 雍明丽,于俊杰,曹慧娟,俞咪娜,潘夏艳,宋天巧,刘永锋. 2021

[11]利用酵母双杂交系统筛选花生AhMYB44互作蛋白. 刘永惠,沈一,沈悦,陈志德. 2020

[12]传染性法氏囊病病毒VPP5酵母双杂交诱饵载体的构建及互作宿主细胞蛋白的筛选. 王念,张礼洲,陈玉明,卢珍,高立,高玉龙,王永强,高宏雷,刘长军,崔红玉,李凯,王笑梅,祁小乐. 2015

[13]稻瘟菌蛋白激发子MoHrip1结构与功能的研究. 刘新奇,邱德文,曾洪梅. 2012

[14]真菌蛋白激发子PevD1互作蛋白的酵母双杂交筛选及融合蛋白的原核表达. 伍文宪,韩磊,杨秀芬. 2014

[15]青稞酵母双杂文库的构建及HVUL0H33228.2互作蛋白的筛选. 羊海珍,顿珠加布,徐齐君. 2023

[16]甘蓝型油菜温敏GMS TE5A幼蕾酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选. 李可琪,王莎莎,曾新华,闫晓红,吴刚. 2016

[17]巴西橡胶树HbHMGR1在开割前后胶乳中的互作蛋白筛选. 晁金泉,赵一杰,吴绍华,杨署光,田维敏. 2021

[18]茄子Enhanced disease susceptibility 1互作蛋白的初步筛选与分析. 肖熙鸥,林文秋,李可,冯雪峰,李威,邹华芬,金辉. 2018

[19]青枯菌诱导的桑树根部酵母双杂交文库构建和MaTGA1互作蛋白的筛选及鉴定. 戴凡炜,王振江,罗国庆,钟建武,李智毅,唐翠明. 2023

[20]大丽轮枝菌及激素处理后棉花酵母双杂交文库的构建. 许艳,李冉,宋健,王丹,周雷,李俊娇,张丹丹,陈捷胤,戴小枫,杨星勇. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序