白地霉ch-3脂肪酶Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 付建红

作者： 付建红;姚斌;杨浩萌;欧阳平凯;石玉瑚

作者机构：

关键词： 大肠杆菌;白地霉ch-3;脂肪酶;基因克隆

期刊名称： 生物加工过程

ISSN： 1672-3678

年卷期： 2008 年 6 卷 03 期

页码： 68-73

收录情况： CSCD

摘要： 构建了白地霉脂肪酶Ⅰ的基因工程菌,为进一步进行蛋白质工程改造和脂肪酶应用奠定了基础。从新疆昌吉市油脂化工厂含油冻土中分离得到1株低温脂肪酶产生菌-白地霉ch-3。该菌发酵上清液中的脂肪酶最适作用温度为35℃,在0℃仍可保持66%的相对酶活力。应用PCR技术从白地霉ch-3基因组DNA中克隆得到脂肪酶Ⅰ基因lip1,将该基因与原核表达质粒载体pET-22b(+)连接,构建重组质粒pETl-ip1,转化E.coliBL21(DE3),酶切鉴定,筛选得到重组菌。十二烷基磺酸钠-聚丙希酰胺(SDS-PAGE)显示重组脂肪酶Ⅰ的相对分子质量约为5.8×104,酶活为2.73 U/mL,表明lip1基因的表达产物具有正常的生物学活性。白地霉ch-3脂肪酶Ⅰ基因lip1能够在大肠杆菌中有效地表达。

分类号： Q78

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