坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 闫大为

作者: 闫大为;吴晓刚;李雪松;石迎;冯琳琳;崔宏锐;李国新;李泽君

作者机构:

关键词: 坦布苏病毒;MM1775;反向遗传操作系统

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2015 年 04 期

页码: 8-13

摘要: 本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5'端含有T 7启动子的病毒全长c DNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48 h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种DF-1细胞,72 h后进行间接免疫荧光(indirect immunofulorescence,IFA)和RT-PCR鉴定,结果表明拯救病毒成功。序列测定结果显示,拯救毒的全基因组序列与亲本毒完全一致,表明MM1775反向遗传操作系统构建成功,为进一步研究坦布苏病毒致病性等相关分子机制奠定了基础。

分类号: S852.65

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