抗性候选基因GmMIOX4的表达分析、克隆及过表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘婷

作者： 刘婷;杨若巍;王学敏;于佰双;王惠;段玉玺

作者机构：

关键词： Gm MIOX4基因;大豆胞囊线虫;实时荧光定量PCR;克隆;过表达载体

期刊名称： 大豆科学

ISSN： 1000-9841

年卷期： 2016 年 35 卷 05 期

页码： 730-735

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将两个不同抗性大豆品种灰皮支黑豆和辽豆15人工接种大豆胞囊线虫3号生理小种(SCN3),利用实时荧光定量PCR技术,对SCN3侵染后的早期和线虫完成一个整个生活史时的Gm MIOX4基因相对表达量变化进行分析。结果表明:在SCN3侵染下,辽豆15根内的Gm MIOX4基因在25 dpi时,相对表达量升高,而灰皮支黑豆根内的Gm MIOX4基因在10 dpi时被诱导表达,相对表达量达到最高值,表明该基因在此时期发挥一定作用。线虫侵入大豆根内10 d是其通过合胞体吸取寄主营养从而维持正常生长发育的时期,在10 dpi该基因被诱导表达,使其合胞体结构发生改变,从而抑制线虫发育,最终导致死亡或使灰皮支黑豆根内成虫数量减少,起到抗病效果。随后以抗性品种灰皮支黑豆根系总RNA为模板,利用RT-PCR技术获得了939 bp的Gm MIOX4基因的CDS序列,克隆得到质粒p GEM-MIOX4,再以得到的Gm MIOX4序列为材料构建过表达载体p CAM-MIOX4,为进一步研究Gm MIOX4基因功能奠定了基础。

分类号： S435.651`Q943.2

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