水貂肠炎病毒疫苗株和野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王建科

作者: 王建科;程世鹏;杨莘;易立;许红丽;程悦宁;师新川;武华;闫喜军

作者机构:

关键词: 水貂肠炎病毒;聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测法;疫苗株;野毒株

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2012 年 03 期

页码: 264-267

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了建立水貂肠炎病毒(MEV)疫苗株与野毒株的鉴别检测方法,根据GenBank中的水貂肠炎病毒序列设计了1对引物,用来扩增包含水貂肠炎病毒NS1基因在内的2 013bp大小的片段。通过对国内疫苗毒MEVB株及其他细小病毒参考株的NS1基因序列比较发现,疫苗毒MEVB株NS1基因核苷酸1401位的碱基由T变为C,致使1399位~1404位的核苷酸构成由ATTGAT变异为ATCGAT,多了1个限制性内切酶ClaⅠ酶切位点,其他MEV分离毒株中均未出现此酶切位点。用特异性引物扩增出2 013bp的目的片段后,再用限制性内切酶ClaⅠ进行酶切分析,疫苗毒MEVB株被切割成1 404bp和609bp的2个片段,国内其他分离株均未出现上述片段。结果表明,所建立的PCR-RFLP方法可以区分疫苗毒MEVB株和野毒株。

分类号: S858.92

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