BBTV单克隆抗体的制备及其检测应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋西娇

作者： 宋西娇;刘欢;周雪平;洪健;吴舒艾;吴建祥

作者机构：

关键词： 香蕉束顶病毒(BBTV);单克隆抗体;Dot-ELISA

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2016 年 24 卷 02 期

页码： 288-294

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)是危害香蕉(Musa paradisiaca)生产的重要病毒。本研究旨在以制备的抗BBTV特异性单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)为核心建立检测BBTV的血清学方法,从而为该病毒的诊断和科学防控提供技术支撑。通过改进提纯方法获得了提纯的BBTV,以BBTV病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),经细胞筛选和克隆,获得1株分泌抗BBTV单克隆抗体的杂交瘤细胞22E3,并制备其单抗腹水。用间接酶联免疫吸附试验(indirect-enzyme-linked immunosorbent assay,in-ELISA)方法测定制备的单抗腹水效价达到10-7,抗体类型及亚类为IgG1,κ轻链。Western blot检测表明,该单抗与BBTV外壳蛋白亚基有特异性反应。利用制备的单抗建立了检测BBTV的斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)。该方法检测感染BBTV香蕉植物组织粗提液呈特异性阳性反应,而和健康香蕉组织呈阴性反应,说明建立的dot-ELISA方法能特异性地检测香蕉植物组织中的BBTV。灵敏度分析表明,以22E3单抗为核心建立的dot-ELISA方法检测香蕉病组织的灵敏度达1∶640(W/V,g/m L)。田间样品检测结果表明,建立的dot-ELISA方法能准确、可靠地用于香蕉中BBTV病毒的检测。BBTV单克隆抗体的制备及其dot-ELISA血清学检测方法的建立为我国香蕉上BBTV的诊断、无毒苗的生产及科学防控提供了物质和技术支撑。

分类号： S436.68

  • 相关文献

[1]南方水稻黑条矮缩病毒dot-ELISA检测试剂盒的应用性能验证. 王亚琴,姜军,黄德青,周雪平,洪健,吴建祥. 2018

[2]牛布鲁氏杆菌斑点酶联快速诊断新技术的研究. 吐尔洪·努尔,谷文喜,何倩倪,热合木江,刘丽娅,钟旗. 2008

[3]应用单克隆抗体酶联免疫斑点试验检测抗传染性喉气管水抗体. 严隽端,刘明,王秀荣,石宗舫,刘晓东,江国托,刘滨东,孔宪刚. 1998

[4]犬细粒棘球绦虫感染Dot-ELISA检测方法的建立. 高珺珊,张西臣,刘原源,寇金华,张壮志,李建华,杨举,李赫,李棕松,宫鹏涛. 2018

[5]直接法MCAB-DOT-ELISA检测日本血吸虫感染耕牛血清循环抗原的研究. 叶萍,张军,田锷,朱顺海,石耀军,林矫矫. 1993

[6]辽宁省蔬菜病毒病调查与鉴定. 徐千惠,赵秀香,吴元华,安梦楠. 2017

[7]侵染西瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测. 宋西娇,陈浙,薛惠明,王荣洲,吴宏宇,吴建祥,洪健. 2016

[8]日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的免疫学特异性分析. 唐天才,石团员,袁东波,侯巍,莫茜,尹杰,阳爱国,郭莉,郝力力. 2020

[9]联合检测鸭瘟和鸭病毒性肝炎血清抗体的Dot-ELISA方法研究. 黄艳艳,胡北侠,张秀美,李士娟,刘玉庆,朱小玲,齐静. 2007

[10]简易的Dot-ELISA法诊断耕牛和家兔日本血吸虫病. 林矫矫,吴文涓,刘训进,叶萍,郑韧坚,王云方. 1991

[11]中国主要大蒜品种和品系的病毒检测. 徐培文,刘宪华,曲士松,高主太,杨崇良,尚佑芬,赵玖华,刘恒英. 2000

[12]养殖刺参腐皮综合征两种致病菌Dot-ELISA快速检测. 谢建军,王印庚,张正,荣小军. 2007

[13]快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立. 王艳,何再平,黄忠荣,张磊萍,王权,蒋蔚. 2018

[14]检测新城疫抗体的Dot-ELISA方法的建立及其与HI方法的比较研究. 黄艳艳,胡北侠,张秀美,沈志勇,刘玉庆,黄庆华,李俊. 2007

[15]新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅳ.Dot-ELISA检测狐狸阴道加德纳氏菌病血清抗体的研究. 阎新华,严忠诚,阎喜军,栾凤英,王长凤. 1995

[16]家蚕核型多角体病毒蛋白组份检测方法建立. 李卫党,李良菊,许化溪,臧磊,刘恭植,季平,何家禄. 1999

[17]Dot-ELISA用于雏鸭病毒性肝炎的诊断. 马秀丽,宋敏训,李峰,王春玲,刘玉山. 2004

[18]快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立. 王艳,何再平,黄忠荣,张磊萍,王权,蒋蔚. 2018

[19]新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究Ⅳ.Dot-ELISA检测狐狸阴道加德纳氏菌病血清抗体的研究. 阎新华,严忠诚,阎喜军,栾凤英,王长凤. 1995

[20]重庆辣椒上番茄斑萎病毒的血清学检测及分子鉴定. 荆陈沉,楚成茹,吴根土,孙现超,谢艳,刘勇,青玲. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序