转基因抗虫玉米的定量检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙红炜

作者： 孙红炜;李凡;杨淑珂;张广远;路兴波

作者机构：

关键词： 转基因抗虫玉米;SYBR Green I;Taqman;real-time PCR

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2014 年 30 卷 06 期

页码： 101-107

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立高效、快速、准确的抗虫转基因玉米MIR162转化体特异性实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。采用SYBR Green I和Taqman探针2种定量方法对抗虫转基因玉米MIR162进行了检测研究。SYBR Green I法MIR162转化体特异性片段和内标基因zSSIIb的熔解曲线均表现为单一峰,扩增特异性强;二者的扩增效率均在90%~100%之间,标准曲线相关系数R2均大于0.998。2种定量方法的检测限(LOD)均为24个拷贝,定量限(LOQ)为48个拷贝,灵敏度较高。重复测试结果表明,SYBR Green I法的标准偏差(SD)变化范围为0.05~0.13,相对标准偏差(RSD)范围为0.17%~0.40%,Taqman探针法的SD变化范围为0.03~0.14,RSD范围为0.11%~0.44%,说明2种定量检测方法具有良好的重复性和精密度。对MIR162含量为3%、1%和0.5%的混合样品的定量结果为:3.13%、1.09%、0.53%(SYBR Green I法)和3.07%、1.02%、0.50%(Taqman探针法),RSD均小于10%,T检验分析表明2种定量方法定值结果差异不显著。本研究建立的2种实时荧光定量PCR均可有效对转基因玉米MIR162进行定量检测,可根据不同实际需求及实验室条件进行选择相应的检测方法。

分类号： S513

  • 相关文献

[1]转基因玉米防治草地贪夜蛾应用进展. 任龙,沈明鹤,王溪竹,芮昌辉. 2020

[2]靶标害虫对Bt玉米的抗性发展和治理策略. 何康来,王振营. 2019

[3]转基因抗虫玉米对根际土壤主要有机元素含量和酶活性的影响. 梁晋刚,辛龙涛,栾颖,宋新元,张正光. 2019

[4]转基因抗虫玉米Bt蛋白表达量的研究. 李葱葱,刘娜,康岭生,王丹,赵洪锟,张明. 2006

[5]转基因抗虫耐除草剂玉米瑞丰125 Cry1Ab/Cry2Aj杀虫蛋白的时空表达分析. 李东阳,肖冰,王晨尧,杨现明,梁晋刚,吴孔明. 2023

[6]应用转基因玉米防治草地贪夜蛾. 梁晋刚,谢悦,肖冰,毕研哲,李东阳,张秀杰,萧玉涛. 2022

[7]转cry1Ie基因抗虫玉米对根际微生物群落碳代谢的影响. 梁晋刚,辛龙涛,栾颖,宋新元,张正光. 2019

[8]中国转基因抗虫玉米的商业化策略. 李国平,吴孔明. 2022

[9]转基因抗虫玉米对节肢动物多样性影响研究进展. 马月,刘娜,谢彦博,梁晋刚,李飞武. 2022

[10]转基因抗虫玉米环境安全性及我国应用前景. 何康来,崔蕾,王振营. 2011

[11]转cry1Ie基因抗虫玉米对田间节肢动物群落多样性的影响. 张聪,袁志华,何康来,王振营. 2014

[12]转Cry1Ab-Ma基因抗虫玉米CM8101对白符跳和赤子爱胜蚓的影响. 鲁鑫,宋新元,武奉慈,杨小艳,翁建峰,王振华,李新海. 2018

[13]RNAi转基因大豆品系‘B5C9123-5’的RPA可视化检测技术. 张晨,雷展,李凯,李飞武,商颖,许文涛. 2022

[14]猪圆环病毒2型特异性荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 吴晓燕,刘涛,李俊,时建立,韩偲,刘洋,吴家强,周顺,王金宝. 2011

[15]基于特异性聚合酶链式反应的西红花快速分子鉴别研究. 蒋超,袁媛,曹亮,金艳. 2015

[16]虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)实时荧光定量PCR检测方法的建立及对虾样品的检测. 刘珍,张庆利,万晓媛,马芳,黄倢. 2016

[17]牛病毒性腹泻病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 韩猛立,黄新,钟发刚,唐思静. 2014

[18]猪背最长肌PFK-2/FBPase-2荧光定量RT-PCR方法的建立. 李朋颖,汤晓艳,王敏,康大成,颜成英. 2014

[19]1-2月龄荷斯坦奶牛不同组织中FMDV受体亚基αv、β3、β6 mRNA转录水平的相对定量研究. 独军政,常惠芸,薛霜,高闪电,丛国正,邵军军,林彤,包慧芳,才学鹏. 2010

[20]梭子蟹肌孢虫SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立与应用. 陈甜甜,房文红,王元,李新苍,赵姝,周俊芳. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序