猪Th1/Th2型细胞因子重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 温立斌

作者: 温立斌;何孔旺;杨汉春;郭容利;李成仁

作者机构:

关键词: Th1/Th2型细胞因子;外周血单个核细胞;重组质粒;实时荧光定量PCR

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2009 年 24 卷 S1 期

页码: 11-14

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 依据GenBank登录的猪Th1型细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增和克隆了上述因子的101 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了它们各自的标准曲线及直线回归方程。结果表明,该方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,为猪体内IL-2、IL-12I、FN-γ、IL-4、IL-6和IL-10的mRNA水平的定量检测,提供了必要的技术手段。

分类号: S828

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