小鼠MSTN基因RNA干涉载体的构建及干涉效率的检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 安星兰

作者： 安星兰;薛超;朴善花;苗向阳;滕春波

作者机构：

关键词： 小鼠;肌肉生长抑制素(MSTN)基因;RNA干涉

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2012 年 07 期

页码： 44-48+174

收录情况： 北大核心

摘要： 为了筛选小鼠肌肉生长抑制素(MSTN)基因的干涉序列,根据GenBank中小鼠的MSTN基因序列,采用RT-PCR方法克隆获得MSTN基因序列,构建其真核表达载体pcDNA 3.1(+)-MSTN;根据MSTN基因序列设计合成3种MSTN基因干涉序列(M1、M2、M3),并构建相应的RNA干涉载体pRNAT-M1、pRNAT-M2、pRNAT-M3。将构建的真核表达载体pcDNA 3.1(+)-MSTN单独或分别与3种干涉载体共转染293GP细胞,检测干涉载体对MSTN基因的干涉效率。结果表明:试验成功克隆得到与GenBank中的序列同源性为99.91%的小鼠MSTN基因序列,并构建了真核表达载体pcDNA 3.1(+)-MSTN;与转染pcDNA 3.1(+)-MSTN后的293GP细胞中MSTN基因的相对表达量(1.000)相比,转染pRNAT-M1、pRNAT-M2、pRNAT-M3后MSTN基因相对表达量明显下降,pRNAT-M1的干涉效率最高。说明研究成功获得对MSTN基因表达具有明显干涉作用的干涉序列。

分类号： S814.8`Q78

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