人λ-干扰素在BHK-21中的表达及生物学活性的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 严玉兰

作者： 严玉兰;刘洋;曹文雁;步雪峰;步志高;郑金旭

作者机构：

关键词： 干扰素λ;基因转染;生物活性

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2008 年 24 卷 10 期

页码： 950-953

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:研究HuIFN-λ1和HuIFN-λ2真核细胞重组表达及其生物学活性。方法:用水疱性口炎病毒(VSV)刺激人宫颈癌HeLa细胞,用RT-PCR克隆HuIFN-λ1和HuIFN-λ2基因,与PCAGG-EGFP真核表达载体连接,构建重组体PCAGG-HuIFN-λ1和PCAGG-HuIFN-λ2并进行鉴定,后在BHK-21细胞进行表达,采用VSV*GFP于人肺腺癌A549上进行表达产物抗病毒活性测定;并通过已构建的MDBK-Mxp-Luc细胞系对HuIFN-λ1和HuIFN-λ2诱导MxA抗病毒蛋白产生的特性进行研究。结果:HuIFN-λ1-PMD18-TVector和HuIFN-λ2-PMD18-TVector的SacⅠ、XhoⅠ和SacⅠ和SalⅠ双酶切鉴定,均出现610bp大小的带,测序示与GenBank上报道的序列完全一致。PCAGG-HuIFN-λ1活性104IU/mL,PCAGG-HuIFN-λ2活性为102IU/mL,且PCAGG-HuIFN-λ1诱导Mx抗病毒蛋白的表达一定时间内随时间延长表达不断增强,9～12h达高峰,24h后消失(P<0.05)。结论:成功构建了PCAGG-HuIFN-λ1PCAGG-HuIFN-λ2的真核表达载体并在BHK-21细胞中得到表达,其抗病毒活性与诱导Mx抗病毒蛋白密切相关。

分类号： R91

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