猪带绦虫Ddi1-like蛋白的真核表达及其抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何伟

作者： 何伟;殷静;岳生赟;刘仲藜;王帅;才学鹏

作者机构：

关键词： 绦虫;Ddi1-like蛋白;真核表达;蛋白酶

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 582-586

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果,成功利用RACE获得Ddi1-like基因的全长cDNA序列;在真核表达系统中,绦虫上的Ddi1-like重组蛋白获得表达;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,获得重组蛋白即为Ddi1-like蛋白;免疫后获得抗血清,其效价达到1∶12 800。上述结果为后续研究Ddi1-like蛋白的酶切活性研究提供了基础。

分类号： S852.734

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