日本血吸虫凋亡诱导因子SjAIF功能区片段的克隆及表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陆看

作者： 陆看;韩宏晓;洪炀;马茜茜;刘艳涛;韩倩;马帅;傅志强;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;细胞凋亡;凋亡诱导因子

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2015 年 31 卷 02 期

页码： 102-108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的克隆表达日本血吸虫凋亡诱导因子(SjAIF)功能区片段,并对其生物学特性进行初步分析。方法应用PCR技术扩增日本血吸虫凋亡诱导因子的功能区片段,构建原核重组表达质粒并诱导其表达,实时定量PCR分析其在不同发育时期童虫和成虫的转录水平,通过Western-blot和间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性和免疫原性,应用免疫组化分析该蛋白在虫体内的分布情况。结果克隆了SjAIF功能区片段,大小为831bp。成功构建了原核重组表达质粒pET-28a(+)-SjAIF,并在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白分子量35kD。实时定量PCR分析表明SjAIF基因在童虫和成虫的各个发育阶段均有转录,其中7d~21d虫体表达量较低,42d和28d虫体表达量较高,雌虫表达量高于雄虫。重组蛋白具有较好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后诱导产生了较高水平的特异性IgG抗体。该蛋白主要存在于日本血吸虫体被,少部分分布于实质组织中。结论成功表达了SjAIF基因的功能区片段,对其生物学特性进行了初步分析,为进一步研究该基因生物学功能和作用提供了基础。

分类号： R383.2

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