牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 钟发刚

作者： 钟发刚;程安春;王新华;邓宇;郭燕

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;单克隆抗体;IgY;抗原捕获ELISA

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2008 年 28 卷 09 期

页码： 1004-1007

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为抗原免疫BALB/C系小鼠,通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种于BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水,腹水单抗与BVDV均呈阳性反应。将5A9、2G3和5C2(分别结合不同的抗原结合位点)诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板,与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度,用阴性组织样品作为判定检测结果的D490临界值,最后以建立的AC-ELISA检测临床粪样棉拭子27份,结果表明:该方法敏感性、特异性高,与全血病毒分离结果的符合率达86.36%;与全血和粪样RT-PCR检测结果的符合率分别为89.47%和94.74%。阴性对照RT-PCR、病毒分离和AC-ELISA检测均为阴性。

分类号： S854.43

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