FMDV全ORF编码基因的克隆及其腺病毒穿梭质粒的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张兴旺

作者： 张兴旺;王勤;柳纪省;李志勇;王辉;殷相平;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;全开放阅读框;克隆;穿梭载体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 02 期

页码： 93-97

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研制FMD复制缺陷型腺病毒活载体疫苗,通过RT-PCR方法获得了O型口蹄疫病毒(FMDV)全开放阅读框(ORF)基因片段,将其克隆到pMD18-T载体后测序,再将ORF编码基因定向克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建了重组腺病毒穿梭质粒。经PCR、酶切及测序鉴定,所克隆的ORF编码基因序列与原始强毒株Akesu/58的ORF编码基因比较,L、P1、P2、P3基因的核苷酸同源性分别为98.8%、97.9%、99.0%和97.6%,PCR、酶切鉴定重组腺病毒穿梭质粒均获得了长约6.9 kb的目的基因片段。表明,成功获得了含有O型FMDV全ORF编码基因的阳性克隆,并成功构建了含有完整FMDV开放阅读框架的编码基因表达盒的重组腺病毒穿梭质粒。

分类号： S852.65

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