大豆胚尖遗传转化体系优化及抗逆基因GmPK转化研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张洁

作者： 张洁;商蕾;郑文永;邱丽娟;王冬梅

作者机构：

关键词： 大豆;胚尖;遗传转化;根癌农杆菌;GmPK基因

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2012 年 13 卷 02 期

页码： 271-277

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用GUS基因瞬时表达检测方法,通过正交试验以AS浓度、侵染菌液OD值、侵染时间、共培养时间和恢复培养时间5个因素在4个水平上进行分析,优化了农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系,并在此基础上进行了抗逆基因GmPK的遗传转化。结果表明,采用共培养培养基中添加100μmol/L AS、侵染菌液OD600值0.9、侵染15h、共培养5d和恢复培养3d的转化条件最佳,GUS阳性率达74.59%,经PCR及RT-PCR进一步验证获得了转基因阳性植株。利用优化的最佳条件进行抗逆基因GmPK的转化,炼苗移栽成活的再生植株经PCR及PCR-Southern blotting验证,初步证明外源基因已经整合至大豆基因组,转化率为0.6%。

分类号： S565.1

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