稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄磊

作者： 黄磊;俞咪娜;胡建坤;于俊杰;尹小乐;聂亚锋;陈志谊;刘永锋

作者机构：

关键词： 稻曲病菌;T-DNA插入突变;致病力;基因克隆

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2013 年 16 期

页码： 3344-3353

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】分析稻曲病菌T-DNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B-726的生物学性状,分析其T-DNA插入位点的侧翼序列,克隆因外源基因插入被破坏正常表达的基因,为明确该基因在稻曲病菌致病过程中的作用奠定基础,并为稻曲病防治新途径的制定提供理论依据。【方法】通过测定突变菌株B-726生长速率、产孢能力及致病力检测,分析其生物学性状;Southern杂交分析B-726外源基因插入的拷贝数;利用HiTail-PCR获得T-DNA插入位点的侧翼序列;运用RACE-PCR技术,克隆与插入位点毗邻的基因全长;用半定量RT-PCR分析该基因表达情况。【结果】突变菌株B-726与野生菌株P1相比致病力极显著下降,产孢能力、生长速率显著下降。Southern杂交结果显示T-DNA在菌株B-726中以单拷贝形式插入。经过序列分析发现,T-DNA插入在1个命名为Uvt-726上游344 bp处,半定量PCR结果表明,Uvt-726在B-726表达量较P1显著下降。【结论】克隆了1个可能与稻曲病菌致病力相关的基因,推断该基因在稻曲病菌致病过程中起着重要的作用。

分类号： S435.111.4

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