CRISPR/Cas9编辑MeHNL基因创制低生氰糖苷木薯

文献类型： 中文期刊

第一作者： 童玮婧

作者： 童玮婧;罗数;陆新露;沈建福;陆柏益;李开绵;马秋香;张鹏

作者机构：

关键词： 木薯;基因编辑;醇氰酶;低氰化物;生氰糖苷

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2024 年 40 卷 009 期

页码： 11-19

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]木薯(Manihot esculenta Crantz)中含有潜在毒性的生氰糖苷,其食用安全性受到影响且导致加工成本增加.因此,利用生物技术开展低生氰糖苷木薯的培育具有重要意义.[方法]利用CRISPR/Cas9技术对木薯醇氰酶基因MeHNL进行了编辑.该基因编码催化生氰糖苷分解的α-羟基腈裂解酶,编辑靶点位于第1个外显子上,通过农杆菌介导的稳定转化获得了27株阳性植株.[结果]测序分析显示,其中 26 个株系被编辑,编辑效率高达 96.3%.编辑类型主要包括碱基的插入和缺失,少数为碱基替换和大片段缺失.氰化物检测试剂盒染色和HPLC测定分析表明,编辑株系中的氢氰酸和生氰糖苷含量均显著降低.与非编辑植株相比,编辑植株的叶片细长,暗示了MeHNL可能对木薯的生长发育产生影响.[结论]利用CRISPR/Cas9 技术获得了低氰化物的木薯种质,为开展生氰糖苷代谢影响木薯生长发育的研究提供了材料.

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