甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 兴旺

作者: 兴旺;童乐怡;孙燕红;马龙彪;吴则东

作者机构:

关键词: 甜菜;DAMD;体系优化;指纹图谱;DNA

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2017 年 23 期

页码: 6-9

摘要: 为了建立甜菜DAMD扩增体系,以期利用DAMD引物应用于甜菜品种指纹图谱的构建及分子标记辅助育种。本实验利用单因素变量的方法对甜菜DAMD体系进行优化。同时选用12个甜菜品种,利用优化的体系对25条DAMD引物进行扩增。获得甜菜的最适DAMD体系:总体积为20μL,包含模板DNA 10~80 ng、0.75 U的DNA聚合酶、0.2μL的d NTPs(2.5 mmol/L each)以及2.0μL的引物(10μmol/L)。同时25条引物均扩增出了清晰条带,除了个别引物多态性较差外,其余引物多态性都非常的丰富,其中引物62H(-)就可以把实验中用到的12个甜菜品种全部区分开。由此可见,DAMD引物的扩增效率很高,并且扩增结果稳定,条带清晰,非常适合甜菜品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析。

分类号: S566.3

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