环状芽孢杆菌乳糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王元火

作者： 王元火;姚斌;袁铁铮;操时树;张伟;王亚茹;范云六

作者机构：

关键词： 环状芽孢杆菌;乳糖酶;基因表达;酶学性质

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2003 年 11 卷 01 期

页码： 85-90

收录情况： CSCD

摘要： 将环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)中的乳糖酶基因在大肠杆菌(Escherichiacoli)中进行了高效表达,并测定了表达的乳糖酶的基本酶学性质。结果表明,表达的乳糖酶有生物学活性,但与来源于环状芽孢杆菌的原始酶相比,其酶促反应的最适pH、最适温度、Km值,以及酶的pH稳定性和温度稳定性等酶学性质均有较大变化。表达的乳糖酶最适pH为5.0,低于原始酶的pH6.5;最适温度为37 ℃,而原始酶为55 ℃;其耐酸性、耐热性及对金属离子的抗性等方面比原酶有所提高;而且表达的乳糖酶Km比原始酶小285倍、Vmax比原始酶大5.4倍,表明经大肠杆菌表达的乳糖酶有较高的底物亲和力,酶促反应效率更高。从乳糖酶的单位表达量来看,原始酶在环状芽孢杆菌的表达量为20.98U/mL,而在大肠杆菌中的表达量提高到33.102U/mL。

分类号： Q78

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